Die Entstehung des Botanischen Gartens von Florenz geht auf den 1. Dezember 1545 zurück, als der Großherzog Cosimo I. de’ Medici das Grundstück von den Domenikanerschwestern kaufte. Der Garten, der auch unter dem Namen „Giardino dei Semplici“ (Garten der Einfachen, Bescheidenen) bekannt ist, weil er ursprünglich dem Anbau und der Ausstellung von Heilpflanzen diente, ist weltweit der dritt älteste nach jenen von Padua und Pisa.

Der Originalentwurf wurde von Niccolò als „il Tribolo“ bezeichnet, der bereits andere großherzogliche Gärten realisiert hatte, darunter jenen der „Villa di Castello“, während seine Ausgestaltung unter der Leitung des Botanikers Luca Ghini erfolgte, dem 2 Jahre zuvor bereits die Ausführung des Gartens von Pisa übertragen wurde, im Auftrag des Großherzogs. Der Garten wurde im 18. Jh. verbessert und um Sammlungen erweitert, wofür sich Cosimo III. de’ Medici verwendete, der ihn der Pflege der „Società Botanica Fiorentina“ anvertraute, die unter der Leitung des berühmten Botanikers Pier Antonio Micheli stand. Im Jahre 1783, als er der „Accademia dei Georgofili“ untergeordnet wurde, erhielt er die Bezeichnung „Orto Sperimentale Agrario“ (Landwirtschaftlicher Versuchsgarten), anschließend 1847 „Giardino dei Semplici“ und schließlich, im Jahre 1880 „Orto Botanico dell'Istituto di Studi Superiori“.

Heute verfügt der Garten über eine Fläche von 2,39 ha, die durch Wege und Pfade in Abschnitte unterteilt sind. Vervollständigt wird die Anlage durch Gewächshäuser und temperierende Anlagen zum geschützten Anbau von Pflanzen. Der Pflanzenbestand setzt sich aus über 5.000 Exemplaren zusammen, darunter zahlreiche Bäume, die teilweise uralt sind, wie zum Beispiel ein Taxus baccata, der von Micheli um das Jahr 1720 gepflanzt wurde, eine majestätische Korkeiche, die 1805 gepflanzt und nie beschnitten wurde, zahlreiche Nadelbäume, darunter Araucaria, Torreya, Sequoia und ein schönes Exemplar von Metasequoia glyptostroboides, eine Art, die ursprünglich als Fossil kennengelernt und erst 1941 in China entdeckt wurde.

Als besonders bedeutende Sammlungen verdienen einige spezielle Hervorhebung: Die Cycadinae, die Tillandsia, die Orchidazeen und die Farne. Beachtlich, was die Anzahl und die Abmessungen der Gewächse anbelangt, ist die Azaleensammlung, deren Blüten im Frühjahr die Aufmerksamkeit zahlreicher Besucher auf sich zieht. Unter didaktischen Gesichtspunkten sind vor allem die Abschnitte mit Heilpflanzen wichtig, mit Fettpflanzen sowie jene mit fleischfressenden Pflanzen.