Die Sammlung der Drucke und Zeichnungen befindet sich im zweiten Stock der Uffizien (untergebracht im ehemaligen Medici-Theater). Es handelt sich hierbei um eine der bedeutendsten grafischen Sammlungen der Welt.

Die Sammlung wurde ungefähr Mitte des 17. Jh. von Kardinal Leopoldo de' Medici begonnen und seither ständig erweitert. Sie umfasst beinahe 120.000 Zeichnungen und Drucke ab Ende des 14. Jh. bis heute, mit besonderem Fokus auf die toskanische Renaissance und das 17. Jh.

Zu ihrem Schutz sind die Werke von Künstlern aus der Renaissance-Zeit nur Fachleuten zugänglich. Die Bibliothek und die Fotosammlung stehen Wissenschaftlern offen. Außerdem ist eine Restaurierungswerkstätte damit betraut, den Erhaltungszustand der Sammlung laufend zu überwachen. Die Abteilung organisiert regelmäßig Ausstellungen im Ausstellungsraum, wobei auch wissenschaftliche Kataloge aufgelegt werden.